狗狗布鲁氏菌如何查?

单于鑫荣单于鑫荣最佳答案最佳答案

现在还没有针对布鲁菌的检测试剂,但是布鲁菌可以通过PCR方法检测出来! 如果怀疑犬有布鲁杆菌感染的话可以进行布鲁杆菌的监测,监测方法是收集犬的粪便(10g左右),加入2ml 生理盐水搅拌后用研磨器研磨成均匀浆液(注意不要用力过猛导致细菌散落在外界环境中)之后采用倍比稀释法稀释后,取等量稀释度的样品做PCR扩增,阳性即为布氏杆菌感染。

1、布鲁菌的分离鉴定 取1 ml 样品接种到含10%羊血琼脂平板上进行培养,37℃条件培养48h观察生长的菌落情况以及形态特征;挑取疑似布鲁杆菌的单个菌落送北京农博宇生物科技有限公司进行检测(1~2 d可出结果)。

2、布鲁菌PCR检测 (1)材料与仪器 试剂盒、TRIzol试剂、DNAMarker、ExTag HMDNTPs Mixture、Taq酶(宝生物工程大连有限公司)、DNA纯化回收试剂盒(天根生化科技有限公司);紫外分光光度仪(上海优宁维生物科技有限公司)。 (2)实验步骤 ①总RNA提取 根据试剂盒上的操作说明对样品的总RNA进行提取。将所提RNA用酚/氯仿抽提,异丙醇沉淀获得。于-20℃保存待用。

②cDNA合成 根据试剂盒操作说明书使用Oligo(dT)反转录酶以总RNA为模板合成cDNA第一链,反应体系如下: 反应总体积5μl,5×RTBuffer 4μl,Rnase Free dH2O 3μl, Oligo (dT) Primer 1 μl, Total RNA 1 μl, RT Enzyme Mix 0.6μl。37 ℃作用1 h,99 ℃作用5 min终止反应。

③PCR扩增 扩增反应在0.5毫升离心管中进行,包括95 ℃预变性5min; 95 ℃变性30 s,55 ~ 60 ℃退火30 s,72 ℃延伸1 min,共30个循环;最后72 ℃延伸10 min。 PCR产物使用1.2 %凝胶电泳分离并照相记录,同时设非特异性引物阴性对照。PCR扩增产物的回收按照DNA纯化回收试剂盒操作说明进行。

④重组质粒的构建和转化 将所得目的片段与PMD-18 T载体连接,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞。挑取单菌落培养后小量提取质粒,验证是否得到插入片段。

⑤重组质粒的测序 将含有插入片段的质粒送往上海生工进行双向测序。 以上是PCR方法的简要介绍过程及注意事项,希望对您有所帮助,如有错误欢迎指正!谢谢!

优质答主

这个菌,不是检查血液或粪便就能查出是否有感染,而是需要检测唾液中抗体的浓度才能判断是否感染过布鲁氏杆菌病(也称为“肉毒梭状芽孢杆菌”疾病); 只有抗体水平升高到一定程度才表示有布鲁氏菌的感染存在——也就是说在发病初期即使抽血做血常规、生化检查和C反应蛋白的检查也是不能确定的! 因为血清里含有的免疫球蛋白IgG和IgA是保护性抗体,如果动物感染了这种细菌就会在血液中产生相应水平的特异性抗体,而只有当病毒达到一定的滴度后才能对机体起到保护作用;但此时动物可能并没有表现出任何症状(尤其是犬)…… 所以仅凭抗体检测来诊断该病是不科学的,必须结合临床症状和其他实验室检查结果才能判定是否存在细菌感染的可能性。

简涵曦简涵曦优质答主

布鲁氏菌的检查需要抽取狗的血液,皮毛、乳汁、关节液等都可以用来检查布鲁氏菌。

任何动物的血液中都存在布鲁氏菌,所以抽取血液检查布鲁氏菌是比较常用的方法。

狗布鲁氏菌检查血清有凝集反应,可以通过观察是否出现沉淀来确定是否感染了布鲁氏菌。

布鲁氏菌也就是我们所说的布病,是人畜共患的一种传染性疾病,患病的狗有可能将布鲁氏菌传染给人,布鲁氏菌主要有马尔姆达克种、流产种以及猪种,其中最容易感染狗狗的是流产种。布鲁氏菌病严重危害人和动物的健康,布鲁氏菌病在自然界中分布范围十分广泛,各种哺乳动物都可能存在患病风险。患病的动物和被布鲁氏菌污染的环境是犬群布鲁氏菌病的传染源,布鲁氏菌可以通过患病犬的皮毛、乳汁、关节液等排出体外并污染外界环境,患病犬群的犬奶、肉类等都是隐藏的病原。布鲁氏菌主要通过消化道传染,也可以通过破损的皮肤、黏膜、呼吸道传染,该病的病原是布鲁氏菌,布鲁氏菌属于胞内寄生菌,易在吞噬细胞中繁殖。该病原体在酸碱性较高的环境中生长的更好,主要在含血清的培养基上生长,通常在6---8度低温条件及45度的高温条件下存活。布鲁氏菌有比较好的抵抗力,常用消毒药对该病原的消毒效果较好。

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